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    NK细胞在抗肿瘤、抗病毒感染免疫中的作用

    作者: 发表时间:2016/5/14 阅读:5530 次

                                                                                                                                          作者:金朋 张常城

           每个人体内都有一个主要由淋巴细胞组成的免疫系统,他们就像保镖一样,时时刻刻都在保护着机体对抗微生物感染并清除癌变的细胞。根据实验观察,上百个具有活性的淋巴细胞才能清除一个肿瘤细胞。而一立方厘米大小的瘤块中约有10亿个左右的癌细胞。因此,为了有效地杀灭肿瘤细胞,防止肿瘤的形成,需要大量的具有活性的淋巴细胞。免疫细胞治疗就是给患者使用在体外制备的高活性免疫细胞,达到防病治病的目的。

     

           NK细胞治疗及其作用机理

           NK(自然杀伤,natural killer)细胞是机体重要的免疫细胞,在抗肿瘤、抗病毒感染免疫中起着重要的作用。由于NK细胞与T细胞不同,不需预先活化,和肿瘤细胞或被病毒感染的细胞初次相遇就可发挥杀伤作用,因此称之为自然杀伤细胞。

     

     

            NK细胞的作用机理:NK细胞主要通过以下几种方式杀伤靶细胞


           天然细胞毒性(Natural cytotoxicity)

           NK细胞活化后释放穿孔素(perforin)和颗粒酶B(Granzyme B);穿孔素在靶细胞表面穿孔,使颗粒酶B进入靶细胞发挥直接的广谱性杀伤作用。


           抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)

           特异性抗体通过其Fc段结合到NK细胞表面的Fc受体上,把NK细胞导向靶细胞,赋予NK细胞特异性,是多种抗癌单克隆抗体的重要作用机理之一。


           NK细胞产生的细胞因子(NK cell produced factors)

    活化的NK细胞分泌IFN-γ,TNF- α,GM-CSF等多种细胞因子,或直接作用于靶细胞,或通过进一步激活其他种类的免疫细胞攻击靶细胞。


           NK细胞介导的靶细胞凋亡NK cell mediated apoptosis of target cell

           NK细胞表达可以诱导细胞凋亡的蛋白(Fasl)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL),可使靶细胞进入程序性凋亡状态。

     

           HANK细胞治疗核心技术

           HANK细胞治疗的核心技术是其NK细胞体外培养增效剂。它是采用基因工程方法把IL-15、IL-21、及4-1BBL等多种能够活化NK细胞的细胞因子嵌合在膜上,形成的活性因子固相化膜嵌合物。在体外特定的培养条件下,它可以刺激人NK细胞大量扩增并同时高度活化。

     

           HANK细胞治疗技术优势

           和传统的NK细胞不同,HANK(Highly Activated Nature killer)细胞是高活性NK细胞。人外周血中NK细胞只占淋巴细胞总量的10%左右。这些含量很少的NK细胞中90%左右通常处于休眠状态;如果不受刺激活化,只有大概10%左右的NK细胞能够行使杀伤功能。传统的NK细胞治疗中,大多是用一些刺激因子和抗CD3抗体联合活化NK细胞的。虽然要比直接使用强一点,但如此制备的NK细胞活性太弱,NK细胞比例太低,和NK细胞总数太少,达不到预期的疗效,严重地限制了其在临床上的应用。HANK治疗技术完全克服了这些缺点,其最主要的专利技术特点是:


           高活性:和外周血PBMC相比,HANK细胞的杀伤活性提高了20余倍、γ-干扰素表达量增加了300多倍,表达NKp46活化性受体的NK细胞从0.31%增加到65%,提高了约200倍。

           高数量:用从50ml外周血中提取的PBMC进行体外培养,14天左右能扩增到100亿个左右的NK细胞,能够满足临床疗效的有效剂量。

           高纯度:扩增后的NK细胞纯度可以达到80%甚至96%以上;仅用简单的细胞培养技术,就能得到与NK 细胞分离试剂盒相当甚至更高的纯度。

     

                                                       HANK细胞治疗操作流程

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